Yerli kediler için etkili bir lineer deoksiribonükleik asit COVID-19 aşı seçeneğinin araştırılması

Son zamanlarda gösterilen bir makalede bioRxiv* ön baskı sunucusu, araştırmacılar kedigillerde lineer deoksiribonükleik asit (linDNA) şiddetli akut solunum sendromu koronavirüs 2 (SARS-CoV-2) aşı seçeneğini inceledi.

Arka fon

Coronavirüs hastalığı 2019 (COVID-19) pandemisinin etiyolojik ajanı olan SARS-CoV-2, 2019’un sonlarında Çin’de ilk keşfinden bu yana küresel olarak oldukca çeşitli hayvan türlerini, bilhassa de memelileri etkiledi. Amerikan Baytar Hekimler Birliği, insandan insana bulaşmaya ek olarak, bazı evcil hayvanların ve yırtıcı hayvanların, bilhassa de kedilerin, insandan hayvana SARS-CoV-2 yayılımının kanıtlarını gösterdiğini kaydetti.

Önceki birkaç araştırmaya nazaran, kediler COVID-19’a karşı duyarlıdır ve hava kanalıyla bulaşan enfeksiyonlara karşı savunmasızdır; bu, bulaşıcı hastalıkların araştırılmasında hayvan modellerinin kullanılmasının kıymetini göstermiş ve SARS-CoV-2’nin ara hayvan kaynağının hala tanımlanmadığını vurgulamıştır. SARS-CoV-2’nin birçok konukçu türe yüksek bulaşma kapasitesi ve hayvanlar ile insanoğlu arasındaki yakın etkileşim düşünüldüğünde, bulaşma zincirini kırmanın ve kırılgan türlere yayılma tehdidini azaltmanın yollarını bulmak esastır.

Emek verme hakkında

Mevcut araştırmada, bilim adamları, polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) bazlı linDNA’dan yapılmış bir nükleik asit bazlı COVID-19 aşısı kullanan evcil kedilerde randomize bir Faz 1/2 klinik denemesinden elde edilmiş bulguları sundular. SARS-CoV-2 reseptör bağlama alanını (RBD) içeren linDNA aşısının immünojenisitesini ve güvenliğini değerlendirdiler. Ek olarak aşı, elektro-gen transferi (EGT) kullanılarak verildi.

pTK1A-TPA-RBD plazmidinde bulunan SARS-CoV-2 başak (S) proteininin RBD bölgesini barındıran ekspresyon dizisi, PCR primerleri kullanılarak amplifiye edildi. PCR merkezli linDNA amplikon ekspresyon vektörü üretimi için şablon, SARS-CoV-2 S proteininin RBD alanını kodlayan bir plazmit DNA olan pTK1A-TPARBD idi. Yazarlar, protein üretimini uyarmak için bir doku plazminojen aktivatörü (tPA) önder dizisini dahil ettiler.

Araştırmacılar, BALB/c farelerinin iskelet kası süresince SARS-CoV-2 S proteininin RBD bölgesini eksprese eden linDNA’yı yada bir plazmidi elektroporasyon yaparak değerlendirdi. canlıda linDNA COVID-19 aşısının immünojenisitesi. Aşılama protokolü, 6 haftalık BALB/c farelerine 20 μg plazmid DNA, kısaca kuadriseps başına 10 μg yada eşmolar linDNA dozu, kısaca 0. günde ve 28. günde kuadriseps başına 4,3 μg enjekte edilmesini içeriyordu. 38. günde bir kurban ile destek olarak.

Ek olarak araştırmacılar, SARS-CoV-2 enfeksiyonuna yatkın bir hayvan türünde linDNA aşısının etkinliğini değerlendirmek için 11 evcil kediden oluşan bir randomize faz 1/2 klinik araştırma yürüttüler. Aşılama protokolü, 0 ve 28. günlerde iki kez intramüsküler olarak 1 mg linDNA’nın uygulanmasını ve peşinden her bir arka bacağın tibialis cranialis’in ortak lokalize intramüsküler bölgesinin derhal elektroporasyonunu içermiştir.

Ekip, prime ve boosttan sonrasında anti-RBD immünoglobulin G (IgG) titrelerini ölçmek için enzime bağlı bir immünosorbent tahlili (ELISA) kullandı. Böylece evcil kediler içinde SARS-CoV-2 S proteininin RBD bölgesine yönelik linDNA aşısının immünojenisitesi çözümleme edildi. Prime-boost rejimi ile immünize edilmiş 11 kediden 10’unda linDNA aşısı tarafınca üretilen hücresel immün reaksiyonu, 28 ve 56. günlerde tedarik edilen PBMC’ler üstünde bir enzime bağlı immünosorbent nokta (ELISpot) analizi kullanarak araştırdılar.

Sonuçlar

Yazarlar, klinik öncesi bulguların, SARS-CoV-2 RBD bölgesini eksprese eden bir linDNA aşısının, bir prime-boost aşılama rejiminde verildiğinde farelerde immünojenik bulunduğunu gösterdiğini, şundan dolayı devamlı olarak hücresel ve hümoral immün reaksiyonları ortaya çıkardığını kaydetti. LinDNA aşısı güvenliydi ve bir prime-boost aşılama programının parçası olarak kedilere verildiğinde herhangi bir zararı dokunan yan tesiri yoktu.

Bilhassa, linDNA COVID-19 aşı seçeneği, SARS-CoV-2 atalarının S RBD’sine ve üç SARS-‘a karşı hazırlandıktan kısa bir süre sonrasında canlı viral enfeksiyona karşı korunmak için lüzumlu olan bağlayıcı ve nötralize edici antikorları indükleyerek immünojenisite göstermiştir. CoV-2 varyantları (P.1, B.1.1.7 ve B.1526). Ek olarak, B.1.526 ve P.1 varyantlarına karşı bulunanlarla karşılaştırıldığında, atalardan kalma SARS-CoV-2 ve B.1.1.7 suşlarına karşı değerlendirilen nötralize edici titreler büyük seviyede terfi etti. Ek olarak, primedan kısa bir süre sonrasında hümoral immünite ile karşılaştırılabilir bir RBD’ye özgü T hücre reaksiyonu bulunmuş oldu.

Sonuçlar

Toplu olarak, emek harcama verileri, kedileri mevcut linDNA tabanlı COVID-19 aşı talibi ile aşılamanın, RBD seçici T hücre reaksiyonunu indüklediğini ve SARS-CoV-2 ve varyantlarına karşı nötralize edici antikorlar ürettiğini göstermiştir. Ek olarak, kayda kıymet bir negatif vaka yaşanmadı. Bu bulgular, SARS-CoV-2’ye karşı kırılgan hayvanlarda, bilhassa insanlarla yakın temasta bulunanlarda viral bulaşmayı önlemek için aşıların oluşturulmasını teşvik ediyor ve kedilere COVID-19’a karşı meydana getirilen bir genetik aşının immünojenisitesini ve güvenliğini gösteriyor.

Ekip, mevcut kedi verilerinin daha çok araştırmayı desteklemesine karşın, linDNA aşısının daha büyük hayvanları SARS-CoV-2 zorluklarına karşı etkili bir halde koruduğunu göstermek için daha çok gözlem yapılması icap ettiğini belirtti.

Netice olarak, mevcut emek harcama, SARS-CoV-2 linDNA aşısının, kedigiller ve muhtemelen öteki savunmasız hayvan türleri içinde mühim koruyucu T hücre reaksiyonlarını tetikleyen ve antikorları nötralize eden muhteşem bir aşılama platformu sağladığını gösterdi.

*Mühim uyarı

bioRxiv, hakemli olmayan ve bu yüzden kati olarak kabul edilmemesi, klinik uygulamaya/sağlıkla ilgili davranışlara rehberlik etmemesi yada yerleşik data olarak ele alınmaması ihtiyaç duyulan ön bilimsel raporlar yayınlar.